| 產(chǎn)品名 | TY培養(yǎng)基 |
| 別名 | |
| 英文名 | |
| CAS號(hào) | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| EINECS編號(hào) | |
| MDL號(hào) |
操作步驟(僅供參考)：
1、配制 TY 培養(yǎng)基：
①稱取本品8g于990mL蒸餾水或去離子水中,加熱溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至55度后，加入10ml 高壓滅菌的1mol/L氯化鈣溶液，混勻后，傾注培養(yǎng)皿分裝。
②如果需要 TY 瓊脂培養(yǎng)基 ，可在第①步溶解 TY 培養(yǎng)基(粉劑)后加入 15g 瓊脂粉 ，加熱 溶解后再高壓滅菌處理。
2、發(fā)根農(nóng)桿菌甘油菌培養(yǎng)：
①取出甘油菌置于冰上 ，并置于超凈臺(tái)內(nèi) ，后續(xù)操作都在超凈臺(tái)內(nèi)操作。
②把鑷子的頂端在 70%酒精中蘸一下 ，并且在酒精燈上略略燒一下 ，使鑷子的頂端處于 無菌狀態(tài)。
③用鑷子夾取一個(gè)無菌的塑料槍頭或牙簽，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭或牙 簽放到含有 50μg/ml 鏈霉素 的 TY 液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)或細(xì)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi) ，28~30oC ， 約 200rpm 培養(yǎng)至少 24h。
3、農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞的培養(yǎng)：
①取-70°C 保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或冰水浴片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時(shí) 插入冰浴中。
②每 100μl 感受態(tài)加 1μg 質(zhì)粒DNA ，用手撥打管底混勻 ，依次于冰上靜置 5 分鐘、液氮5分鐘、 37°C 水浴 5 分鐘、冰浴5分鐘。
③加入 800μl TY 液體培養(yǎng)基 ，于 28°C 振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)。
④5000rpm 離心 1min 收菌 ，留取 100μl 左右上清 ，輕輕吹打重懸菌塊 ，涂布于含相應(yīng) 抗生素的 TY 平板上 ，倒置放于 28°C 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2~3 天。
1、配制 TY 培養(yǎng)基：
①稱取本品8g于990mL蒸餾水或去離子水中,加熱溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至55度后，加入10ml 高壓滅菌的1mol/L氯化鈣溶液，混勻后，傾注培養(yǎng)皿分裝。
②如果需要 TY 瓊脂培養(yǎng)基 ，可在第①步溶解 TY 培養(yǎng)基(粉劑)后加入 15g 瓊脂粉 ，加熱 溶解后再高壓滅菌處理。
2、發(fā)根農(nóng)桿菌甘油菌培養(yǎng)：
①取出甘油菌置于冰上 ，并置于超凈臺(tái)內(nèi) ，后續(xù)操作都在超凈臺(tái)內(nèi)操作。
②把鑷子的頂端在 70%酒精中蘸一下 ，并且在酒精燈上略略燒一下 ，使鑷子的頂端處于 無菌狀態(tài)。
③用鑷子夾取一個(gè)無菌的塑料槍頭或牙簽，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料槍頭或牙 簽放到含有 50μg/ml 鏈霉素 的 TY 液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)或細(xì)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi) ，28~30oC ， 約 200rpm 培養(yǎng)至少 24h。
3、農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞的培養(yǎng)：
①取-70°C 保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或冰水浴片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時(shí) 插入冰浴中。
②每 100μl 感受態(tài)加 1μg 質(zhì)粒DNA ，用手撥打管底混勻 ，依次于冰上靜置 5 分鐘、液氮5分鐘、 37°C 水浴 5 分鐘、冰浴5分鐘。
③加入 800μl TY 液體培養(yǎng)基 ，于 28°C 振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)。
④5000rpm 離心 1min 收菌 ，留取 100μl 左右上清 ，輕輕吹打重懸菌塊 ，涂布于含相應(yīng) 抗生素的 TY 平板上 ，倒置放于 28°C 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2~3 天。
COA搜索：
客服一
13813788405